Escherichia coli est l’un des systèmes d’expression les plus utilisés pour la production de protéines recombinantes. Dans cette étude, un protocole succinct pour appliquer un mode fed-batch à l’échelle laboratoire avec E. coli et sa montée en échelle jusqu’à 30 litres a été réalisé. Une forte densité cellulaire a été obtenue en mode fed-batch dans un bioréacteur de paillasse Bionet F1, après caractérisation en mode batch à l’aide d’une sonde de densité optique en ligne pour enregistrer automatiquement la croissance. Un taux de croissance spécifique de 0,46 h⁻¹ a été obtenu, conduisant à un rendement en biomasse multiplié par 7 avec la stratégie fed-batch, comparé au mode batch. Le processus développé à l’échelle paillasse a été étendu d’un facteur 10, sous un critère constant de coefficient de transfert volumique d’oxygène KLa, dans un bioréacteur Bionet F2-30 à l’échelle pilote.