Pichia pastoris a été utilisée avec succès comme système efficace pour la production de protéines hétérologues. Ici, nous rapportons le développement d’un procédé semi-continu visant à améliorer la production de protéines recombinantes dans P. pastoris grâce à sa culture dans un bioréacteur de paillasse F1 de 3 litres de BIONET, équipé d’un module de processus continu (CPM). Six lots répétitifs ont été réalisés en mode semi-continu en remplaçant les 2/3 de la culture tous les 72 à 96 h. Le processus global dans une culture de 3 litres a permis d’obtenir une concentration en protéines de 0,28 ± 0,13 mg·mL−1, nécessitant 650 h pour obtenir 6 ± 0,5 g de protéines cibles totales. En revanche, l’obtention de la même quantité de protéines en mode fed-batch nécessiterait environ 1100 h, incluant la préparation de l’inoculum, la phase de fermentation non induite et la phase d’expression. Ainsi, une réduction du temps d’opération et des coûts est évidente en utilisant une stratégie de fermentation semi-continue évolutive. Ces résultats suggèrent un potentiel pour le développement de procédés économiquement efficaces pour l’expression de protéines recombinantes dans P. pastoris en mode semi-continu comme alternative au mode de processus continu productif, non disponible lorsque de faibles taux de dilution sont requis en raison de l’absence de technologie de pompage adaptée.
