La levadura metilotrófica Pichia pastoris es uno de los sistemas de expresión de proteínas recombinantes más utilizados, con aplicaciones que van desde la industria alimentaria hasta la farmacéutica. Es capaz de crecer usando metanol como única fuente de carbono, mediante el promotor alcohol oxidasa (AOX), un fuerte inductor de la expresión de proteínas recombinantes.
Uno de los aspectos críticos en las estrategias de adición de metanol en estos cultivos es el momento de inducción y evitar su adición excesiva, ya que su acumulación resulta tóxica para la levadura cuando supera ciertos valores de concentración en el medio. Existen sensores de monitoreo en línea limitados para los niveles de metanol a nivel de proceso, que además puedan integrarse con el software de control y las bombas de adición de sustrato.
En este trabajo, la evolución de la composición de gases de escape en O₂ y CO₂ se ha utilizado como alternativa a los sensores de metanol en línea, principalmente observando la evolución del CO₂, para establecer estrategias óptimas de alimentación de metanol y momento de inducción. Para ello, se utilizaron fermentadores de banco y piloto de Bionet con módulos externos para el análisis continuo de O₂ y CO₂, integrados en el software del equipo.
Este trabajo preliminar permitirá implementar futuros controles que optimicen las estrategias de adición de sustrato en procesos de fermentación mediante la medición directa del metabolismo celular.
