Pichia pastoris se ha utilizado con éxito como un sistema de expresión eficaz para la producción de proteínas heterólogas. En este trabajo, presentamos el desarrollo de un proceso semicontinuo para mejorar la producción de proteínas recombinantes en P. pastoris mediante su cultivo en un biorreactor de sobremesa F1 de BIONET de 3 L, equipado con un módulo de proceso continuo (CPM). Se llevaron a cabo seis lotes repetitivos en un proceso semicontinuo, sustituyendo 2/3 del cultivo cada 72-96 h. El proceso global en un volumen de 3 L de cultivo produjo una concentración de proteína de 0,28 ± 0,13 mg·mL⁻¹, tardando 650 h en obtener 6 ± 0,5 g de proteína objetivo total. Por el contrario, la obtención de la cantidad equivalente de proteína en modo fed-batch requiere alrededor de 1100 h de tiempo total, incluyendo la preparación del inóculo, la etapa de fermentación no inducida y la etapa de expresión. Por lo tanto, la reducción del tiempo de operación y del coste operativo es evidente cuando se utiliza una estrategia de fermentación semicontinua. Estos resultados sugieren una interesante oportunidad para el desarrollo de procesos rentables para la expresión de proteínas recombinantes en P. pastoris en modo semicontinuo como alternativa al modo de proceso continuo productivo, que no está disponible cuando se requieren bajas tasas de dilución (debido a la falta de tecnología de bombeo disponible).
